β-半乳糖苷酶染色衰老细胞呈蓝色实验报告-上海郑核

一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称 厂家 型号

冰冻切片机 Thermo CRYOSTAR NX50

切片刀 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819

载玻片 Servicebio

正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号

OCT包埋剂 Sakura 4583

β-半乳糖苷酶染色固定液 碧云天生物技术有限公司 C0602-1

β-半乳糖苷酶染色液A 碧云天生物技术有限公司 C0602-2

β-半乳糖苷酶染色液B 碧云天生物技术有限公司 C0602-3

β-半乳糖苷酶染色液C 碧云天生物技术有限公司 C0602-4

X-Gal溶液 碧云天生物技术有限公司 C0602-5

甘油明胶封片剂 Servicebio G1402

二、染色步骤

1、工作液配制：染色液C 930ul，染色液A 10ul，染色液B 10ul，X-Gal溶液50ul，依次

加入，混匀即为工作液。

2、固定：取一张没经过固定的新鲜冰冻切片自然晾干，β-半乳糖苷酶固定液固定15min，倾去固定液，蒸馏水洗3遍；

3、β-半乳糖苷酶染色：甩干片子上的水，将工作液滴于组织上，于37℃孵育16至18h。

4. 倾去工作液，蒸馏充分水洗3次。

5. 甘油明胶封片剂封片。

三、结果判读：

衰老细胞呈蓝色。

四、注意事项：

1、标本需要是新鲜的冰冻切片或细胞，不能经过固定。

2、染液需要在-20℃的条件下储存，保质期一年。

3、工作液要现配现用，不可保存。

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