刚果红染色实验观察淀粉样蛋白呈红色-上海郑核

一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称 厂家 型号

脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J

包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5

病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016

冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5

组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P

烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230

载玻片 Servicebio

正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号

无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683

二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418

刚果红染液套装 Servicebio G1056

苏木素染液 servicebio G1004

分化液 servicebio G1005-3

返蓝液 servicebio G1005-4

中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。

2、刚果红染色：切片入刚果红染液1h，自来水洗2min。

3、背景分化：氢氧化钾溶液分化，至阳性斑块明显，背景基本无色，自来水洗。

4、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。

5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：

淀粉样蛋白呈红色，细胞核呈浅蓝色。

四、注意事项：

1、区分甲状腺胶质、弹力纤维和胶原纤维，可能都会染成红色；

2、分化时要掌握恰当，分化不足，胶原纤维也呈红色，分化过度，淀粉样变蛋白也可脱色。

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