冰冻切片油红O染色观察脂滴呈红色-上海郑核

一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称 厂家 型号

冰冻切片机 Thermo CRYOSTAR NX50

切片刀 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819

载玻片 Servicebio

2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号

固定液 Servicebio G1101

油红染液 Servicebio G1016

苏木素染液 servicebio G1004

分化液 servicebio G1005-3

返蓝液 servicebio G1005-4

甘油明胶封片剂 Servicebio G1402

二、实验步骤

1、新鲜冰冻切片固定：将冰冻切片复温干燥，固定液中固定15min，自来水洗，晾干。

2、油红染色：切片入油红染液浸染8-10min(加盖避光)，蒸馏水洗；

3、背景分化：75%酒精稍分化，蒸馏水洗。

4、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。

5、封片：甘油明胶封片剂封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：

脂滴呈橘红色至鲜红色，细胞核蓝色。

四、注意事项：

1、如果是新鲜组织冰冻切片，需要先固定再染色；如果组织是固定以后冰冻切片，可以将

切片晾干以后，直接染色。

2、整个操作过程中注意动作轻缓，不宜动作太大，以免脂肪丢失或者移位。

3、染色结果不能长期保存，封片后应尽快观察及拍照。

4、甘油明胶常温下为凝固状，一般60℃烤箱中保存。封片后如有气泡不能按压玻片也不宜

强行扯下盖玻片，玻片可入温水中，让盖玻片自行脱落，然后重新封片

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